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MF-10
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一、產品用途:

1. 蛋白分離:

生物樣品通常含有豐富多樣的蛋白質,這使我們分離目標蛋白異常困難。有了MF-10,我們可以有選擇淘汰高豐度蛋白,將樣品中所有蛋白按照分子量和電荷不同分成8種組分,目標蛋白就能輕松高效分離出來。分離所得蛋白保持天然狀態不變性,可進行下游分析,如質譜、凝膠電泳等;

2. 脫鹽:

去除樣品中低分子量雜質如SDS等,除雜過程中樣品沒有損失;

3. 蛋白濃縮:

從復雜的生物基質比如血清、尿液中可輕松將目標蛋白濃縮20倍以上。

二、儀器特點:

1. 5-1000kDa蛋白質組分均可分離;

2. pH3-10的蛋白質組分均可分離;

3. 在變性或者自然狀態下均可分離;

4. 分離過程中不需要SDS或其他兩性電解質;

5. 整個分選過程最快只需10分鐘;

6. 安全性:打開樣品蓋,儀器停止工作;合上樣品蓋,儀器繼續運行。

三、產品原理:

MF-10是利用PrIME膜電泳預分離技術進行蛋白質組分分選的儀器,根據目標蛋白的等電點和分子量,選擇不同pH的緩沖液和不同孔徑的聚丙烯酰胺分離膜,在分離池中施加電場時,不同等電點和分子量的蛋白組分通過親水膜分選,進入不同的分離槽,此過程中蛋白質保持自然狀態,不變性。

四、技術參數:

1. 分離蛋白分子量范圍:5-1000kDa

2. 樣品體積:最大 2×200μl

3. 緩沖液pH范圍:3-10

4. 定時范圍:1min10h

5. 每次可分離樣品數量:1-2

6. 樣品每次可分離組分數:2-8

7. 緩沖液泵額定流動速率:1.42.6L/min

8. 最大輸入電流:4.1 A

9. 工作電壓:20200V DC

10. 分離電流:1100 mA DC

11. 分離功率:025 W

12. 分離緩沖液溫度:540

13. 最大相對濕度:80%(溫度達到31℃)

14. 環境溫度:435

15. 尺寸 (W x D x H) 260 mm×300 mm×170 mm

16. 重量:約9kg

五、分離模式:

1. 依據蛋白等電點分離

假定某樣品中各蛋白等電點在5.58.5之間,目標蛋白等電點接近8.5,其它蛋白等電點在5.58左右,我們選擇pH8左右的緩沖液,那么目標蛋白帶正電荷,其它蛋白帶負電荷,當分離池中施加電場時,目標蛋白向負極移動,其它蛋白向陽極移動,這樣各種蛋白因為等電點不同而分離到不同分離槽中。

2. 依據蛋白分子量分離

假定我們要分離的目標蛋白分子量在100KD左右,選擇pH10左右的緩沖液,那么樣品中所有的蛋白均攜帶負電荷,在分離池中施加電場時,所有的蛋白均從負極向陽極移動,小于150KD的蛋白均可以通過150KD的聚丙烯酰胺分離膜,小于75KD的蛋白均可以通過75KD的分離膜,目標蛋白可以通過150KD的分離膜而無法通過75KD分離膜,停留在150KD75KD的分離膜之間的分離槽中,用移液器從分離槽中吸取目標蛋白,可進行質譜等后續分析。

 

3. 依據蛋白等電點和分子量分離 假定我們要分離的蛋白混合液含有如下幾種蛋白:

 

A蛋白分子量在200-250KD,等電點在3-4;

 

B蛋白分子量在100-150KD,等電點在5-6;

 

C蛋白分子量小于50KD,等電點在4-5;

 

D蛋白分子量小于50KD,等電點在9-10;

 

C為我們的目標蛋白。

 

如果我們選擇pH6.5的緩沖液,那么ABC三種蛋白均帶有負電荷,D帶正電荷,在分離槽中施加電場時,ABC向陽極移動,D向負極移動,但由于AB分子量大于50KD,無法通過50KD聚丙烯酰胺分離膜,只有C能通過分離膜進入0-50KD之間的分離槽,從而將目標蛋白和雜蛋白通過分子量和等電點徹底分開。

 

六、結構分析:

 

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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